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实时荧光定量PCR快速检测下呼吸道标本耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床应用
Real-time fluorescence quantitive PCR for rapid detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus directly from lower respiratory tract

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DOI:
作者:
周俊，陈旭，李敏，韩立中
Zhou jun，Chen xu，Li min，Han lizhong
作者单位:
上海交通大学附属瑞金医院呼吸内科 上海交通大学附属瑞金医院临床微生物科 上海交通大学附属瑞金医院呼吸内科 上海交通大学附属瑞金医院临床微生物科
Department of Respiratory,Ruijin Hospital,Shanghai Jiaotong University School of Medicine Department of Clinical Microbiology,Ruijin Hospital,Shanghai Jiaotong University School of Medicine
关键词:
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；下呼吸道标本；细菌培养；实时荧光定量聚合酶连反应；快速检测
Methicillin-resistant Staphylococcus aureus; Lower respiratory tract specimens; Bacteria culture; Real-time fluorescence quantitive PCR; Rapid detection
摘要:
目的：采用实时荧光定量PCR方法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）核酸测定，建立呼吸道标本的快速MRSA检测技术。方法:收集临床分离的75株金黄色葡萄球菌菌株及下呼吸道合格痰标本97份，用实时荧光定量PCR法检测其Nuc及MecA基因，并以头孢西丁纸片扩散法为标准，判断实时荧光定量PCR法与传统方法的一致性及对于下呼吸道痰标本检测的敏感性、特异性。结果:以头孢西丁纸片扩散法为对照，实时荧光定量PCR法对于75株临床分离的金黄色葡萄球菌菌株的检测敏感性及特异性均为100%，对于97份临床下呼吸道标本的MRSA检测的敏感性为90.48%，特异性为91.95%。结论：采用实时荧光定量PCR法快速检测下呼吸道MRSA的敏感度高、特异性强，操作时间短，并与常规培养+药敏结果具有良好一致性，具有较高的临床应用价值。
OBJECTIVE Using real-time fluorescence quantitive PCR for the detection of MRSA nucleic acid to establishing the rapid detection technology for the MRSA pathogen of respiratory specimens. METHODS Collection 75 Staphylococcus aureus strains and 97 lower respiratory tract specimens , using Real-time fluorescence quantitive PCR to detect the Nun and MecA genes and isolation-culture-K-B paper disk diffusion method was performed meanwhile as a standard to judge the accordance of the PCR and traditional method and the sensitivity and specificity of the real-time fluorescence quantitive PCR. RESULTS Compared with isolation-culture-K-B paper disk diffusion method, the real-time fluorescence quantitive PCR has 100% sensitivity and specificity in the 75 S.aureus strains and has 90.48% sensitivity and 91.93% specificity in the 97 lower respiratory tract clinical samples . CONDLUSIONS Real-time fluorescent quantitive PCR has high sensitivity、specificity and short operating time in the detection of MRSA from clinical respiratory tract specimens and has good consistency with conventional culture plus susceptibility results. This method has high clinical value.

 

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