目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织标本中自噬相关基因和蛋白的表达情况。
方法 标本取自45例因肺部占位性病变行肺叶切除术患者的肺组织,根据患者有无COPD,分为非COPD 组(对照组,15例)和COPD 组(30例);再根据COPD 患者的肺功能,将COPD 组分为轻度COPD 组(12 例)、中度COPD 组(12例)、重度COPD 组(6例)。采用免疫组织化学染色观察肺组织中自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)B的表达;采用Western印迹法和实时定量PCR 检测肺组织标本中自噬相关基因Atg5、酵母自噬相关基因Atg6同系物(Beclin1),以及自噬相关基因Atg5、Beclin1、LC3B的蛋白表达。
结果 非COPD 组的肺组织结构清晰,未见支气管、肺泡结构破坏,炎性细胞浸润等。COPD 组的肺组织结构破坏明显,肺气肿形成,肺实质有肺泡管、肺泡腔扩大,上皮细胞脱落、坏死等。LC3B蛋白主要表达于肺上皮细胞细胞质中,可见清晰的棕黄色颗粒。与非COPD 组相比,COPD 组肺上皮细胞细胞质中棕黄色颗粒增多,染色强度增加。轻度COPD 组、中度COPD 组和重度COPD 组的Beclin1mRNA 均显著高于非COPD 组(犘值分别<0.01、0.05),轻度COPD组和中度COPD 组的Atg5mRNA 均显著高于非COPD 组(犘值分别<0.01、0.05),重度COPD 组与非COPD组间Atg5mRNA 的差异无统计学意义(犘>0.05)。中度COPD 组的Beclin1mRNA 和Atg5mRNA 分别显著高于轻度COPD 组和重度COPD 组(犘值均<0.01),轻度COPD 组的Beclin1mRNA 和Atg5mRNA 分别显著高于重度COPD 组(犘值均<0.05)。轻度COPD 组和中度COPD 组的Atg5蛋白表达量均显著高于非COPD组(犘值分别<0.01、0.05),重度COPD 组与非COPD 组间Atg5蛋白表达量的差异无统计学意义(犘>0.05);轻度COPD 组、中度COPD 组和重度COPD 组的Beclin1蛋白和LC3B 蛋白表达量均显著高于非COPD 组(犘值分别<0.01、0.05)。中度COPD 组的Beclin1、Atg5、LC3B 蛋白表达量分别显著高于轻度COPD 组和重度COPD 组(犘值分别<0.05、0.01),轻度COPD 组的Beclin1、Atg5、LC3B 蛋白表达量分别显著高于重度COPD组(犘值均<0.05)。
结论 在COPD 的进展过程中自噬相关基因和蛋白表达增多,提示可能与疾病的发展有关。