目的　应用小鼠铜绿假单胞菌（ＰＡ）腹腔感染模型，研究抗ＰｃｒＶ 单克隆抗体Ｍａｂ１６６与抗ＰＡ 抗
生素联合使用对ＰＡ 耐药性的影响。

方法　腹腔内注射不同数量［１×１０６、１×１０７、１×１０８ 菌落形成单位（ＣＦＵ）］ＰＡ１０３细菌悬液建立小鼠腹腔感染模型。在造模２ｈ 后，腹腔内注射不同质量浓度的头孢他啶（１、２ｇ／ｋｇ）、妥布霉素（３、１０ｍｇ／ｋｇ）、哌拉西林／他唑巴坦（１、２ｇ／ｋｇ）或不同质量的Ｍａｂ１６６抗体（１００、２００μｇ），选取２４ｈ内小鼠存活率为４０％～８０％为理想的实验剂量。将腹腔感染模型小鼠分为对照组、Ｍａｂ１６６ 治疗组、３种不同抗生素治疗组和３种不同抗生素＋Ｍａｂ１６６治疗组，每组１０只。Ｍａｂ１６６治疗组在造模后立即给予抗ＰｃｒＶ 抗体Ｍａｂ１６６２００μｇ（总体积０．３ｍＬ）；３种不同抗生素治疗组在造模２ｈ后分别于腹腔内注射头孢他啶１ｇ／ｋｇ、妥布霉素３ｍｇ／ｋｇ或哌拉西林／他唑巴坦１ｇ／ｋｇ（总体积０．３ｍＬ）；３种不同抗生素＋Ｍａｂ１６６治疗组先后给予前述剂量的Ｍａｂ１６６和抗生素；对照组给予等体积ＰＢＳ。２４ｈ后采集小鼠腹水样本，用肉汤稀释法将腹水中ＰＡ 菌株接种于含不同质量浓度（１～５１２ ｍｇ／Ｌ）、不同抗生素的溶菌肉汤（ＬＢ）液体培养基中，３７ ℃ 孵育４８ｈ后测溶液光密度（犗犇）值，以培养基犗犇值减去ＬＢ 培养基犗犇值的半定量方法表示细菌数量，犗犇值接近０时的抗生素质量浓度为最低抑菌浓度（ＭＩＣ）。

结果　１×１０７ ＣＦＵ 及以上的ＰＡ１０３ 细菌悬液可使全部小鼠死亡，后续实验均采用１×１０７ ＣＦＵ 为造模剂量。腹膜炎组（未经抗生素治疗）５只小鼠的２４ｈ存活率为０；经头孢他啶２ｇ／ｋｇ或妥布霉素１０ｍｇ／ｋｇ治疗后，２４ｈ存活率均为５／５；经头孢他啶１ｇ／ｋｇ治疗后，２４ｈ存活率为３／５；经妥布霉素５ｍｇ／ｋｇ治疗后，２４ｈ存活率为２／５；经哌拉西林／他唑巴坦１ｇ／ｋｇ治疗后，２４ｈ 存活率为４／５；经哌拉西林／他唑巴坦２ｇ／ｋｇ 治疗后，２４ｈ 存活率为３／５。应用不同种类和剂量的抗生素治疗后，小鼠２４ｈ内生存时间均显著长于腹膜炎组（犘值均＜０．０１）。经Ｍａｂ１６６２００μｇ 治疗后，２４ｈ 存活为１／５，小鼠２４ｈ内生存时间显著长于腹膜炎组（犘＜０．０１）；但经Ｍａｂ１６６１００μｇ治疗后，５只小鼠的２４ｈ存活率为０，小鼠２４ｈ内生存时间与腹膜炎组的差异无统计学意义（犘＝０．２３）。经培养４８ｈ后，在未经治疗的腹膜炎小鼠中，头孢他啶、妥布霉素、哌拉西林／他唑巴坦对ＰＡ１０３菌株的ＭＩＣ 值分别为８、８ 和１６ ｍｇ／Ｌ，加用Ｍａｂ１６６ 治疗后ＭＩＣ 值分别降低至４、２和４ｍｇ／Ｌ。给予质量浓度为１、４、８、１６ ｍｇ／Ｌ 头孢他啶，１、２、４ ｍｇ／Ｌ 妥布霉素，１、２、４、８、１６ｍｇ／Ｌ哌拉西林／他唑巴坦后，Ｍａｂ１６６治疗组的培养基犗犇值均显著低于对照组（犘值均＜０．０５）。经头孢他啶治疗，１ｍｇ／Ｌ 质量浓度头孢他啶治疗组的培养基犗犇值显著低于对照组（犘＜０．０５），但８、１６、３２、６４、１２８、２５６、５１２ｍｇ／Ｌ质量浓度头孢他啶治疗组的培养基犗犇值均显著高于对照组（犘值均＜０．０５），ＭＩＣ 值升高至＞５１２ｍｇ／Ｌ；但各质量浓度Ｍａｂ１６６＋头孢他啶治疗组的培养基犗犇值均显著低于头孢他啶治疗组（犘值均＜０．０５），腹水中ＰＡ１０３对头孢他啶呈强敏感性（ＭＩＣ≤１ ｍｇ／Ｌ）。经妥布霉素治疗，１、２、４ ｍｇ／Ｌ 质量浓度妥布霉素治疗组的培养基犗犇值均显著低于对照组（犘值均＜０．０５），但两组的ＭＩＣ 值相近；１、２、４ ｍｇ／Ｌ 质量浓度Ｍａｂ１６６＋ 妥布霉素治疗组的培养基犗犇值均显著低于妥布霉素治疗组（犘值均＜０．０５），ＭＩＣ 值降低至２ｍｇ／Ｌ。经哌拉西林／他唑巴坦治疗，１、２、４、８ｍｇ／Ｌ 质量浓度哌拉西林／他唑巴坦治疗组的培养基Ｏ犇值均显著低于对照组（犘值均＜０．０５），ＭＩＣ 值也降低至２ ｍｇ／Ｌ；１、２、８、３２、６４、２５６、５１２ ｍｇ／Ｌ 质量浓度Ｍａｂ１６６＋ 哌拉西林／他唑巴坦治疗组的培养基犗犇值均显著低于哌拉西林／他唑巴坦治疗组（犘值均＜０．０５），ＭＩＣ 值降低至≤１ｍｇ／Ｌ。

结论　抗ＰｃｒＶ 抗体Ｍａｂ１６６与抗生素联合治疗能够提高小鼠ＰＡ 腹腔感染模型对抗生素的敏感性，且能够减少由头孢他啶诱导产生的获得性耐药。