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树状大分子包裹的纳米金颗粒载体人铁蛋白重链转染自然杀伤细胞９２和磁共振成像

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DOI:
作者:
卓瑶瑶　陈　锋　孔令丹　杨　嘉　鲁伦博　李　婷　史向阳　李康安
作者单位:
上海交通大学附属第一人民医院放射科（卓瑶瑶、杨嘉、鲁伦博、李婷、李康安）；东华大学化学化工学院（陈锋、孔令丹、史向阳）
关键词:

摘要:
目的　以聚乙二醇化树状大分子包裹的纳米金颗粒作为非病毒载体，将人铁蛋白重链（ＦＴＨ１）转染到自然杀伤细胞９２（ＮＫ９２细胞）中，并进行体外细胞ＭＲＩ检查。 方法　将第５代聚酰胺胺树状大分子用聚乙二醇（ＰＥＧ）修饰之后包裹纳米金颗粒作为非病毒载体，压缩犉犜犎１报告基因然后转染到ＮＫ９２细胞内。应用磁共振氢谱、紫外分光光度计和透射电子显微镜等对合成的载体材料进行表征；采用琼脂糖凝胶电泳实验确定载体材料与相应基因之间最佳压缩的氮磷比；应用细胞计数试剂盒８（ＣＣＫ８）检测载体材料的毒性；通过测 定水动力粒径来确定不同氮磷比的条件下载体材料和基因形成的复合物能否顺利通过细胞膜；应用荧光显微镜和流式细胞仪测定转染效率；应用３．０Ｔ 的ＭＲＩ对转染ＦＴＨ１的ＮＫ９２细胞进行体外成像。 结果　合成的聚乙二醇化的包裹纳米金颗粒的树状大分子｛（Ａｕ０）２５Ｇ５．ＮＨ２犿ＰＥＧ１７｝ＤＥＮＰｓ具有较好的生物相容性，材料细胞毒性较小，在浓度达到３０００ｎｍｏｌ／Ｌ 时细胞存活率仍然能达到６０％以上。荧光显微镜和流式细胞仪测定 显示，在氮磷比为１∶１、２∶１、５∶１、１０∶１时，转染效率分别为５７．８％、６４．０％、８０．２％、３８．３％。在２００ 和 ５００μｍｏｌ／Ｌ枸橼酸铁铵的条件下，ＭＲＩ检查发现Ｔ２加权像（Ｔ２ＷＩ）的信号均降低，后者更为明显。 结论　聚乙二醇化树状大分子包裹的纳米金颗粒能够成功地转染目的基因，ＭＲＩ检查能有效地在体外检测ＦＴＨ１转染之后的ＮＫ９２细胞，为ＭＲＩ活体示踪自然杀伤细胞过继免疫肿瘤治疗奠定了基础。

 

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