目的 探究FAM40A 在肾小球足细胞中的表达和定位,及其是否影响肾小球足细胞的细胞骨架和细胞形态。
方法 通过体外培养永生化的小鼠肾小球足细胞,观察FAM40A 在小鼠足细胞上的表达和定位。应用小干扰RNA(siRNA)转染沉默技术,构建FAM40A 基因沉默的肾小球足细胞模型,通过细胞免疫荧光、PCR 和Western印迹法,观察FAM40A 基因沉默后足细胞F肌动蛋白(F-actin)分布的改变。
结果 在小鼠足细胞,FAM40A 主要表达于细胞核和细胞核周围的细胞质内。分化成熟的肾小球足细胞在FAM40A 基因沉默后,F-actin在靠近细胞膜的区域分布增加,而在细胞质的中央区域分布明显减少,细胞边缘变得毛糙,细胞形态发生了较大改变。
结论 FAM40A 参与了足细胞的细胞骨架动态调节过程,沉默FAM40A 基因可促使肾小球足细胞骨架蛋白F-actin向细胞膜再分布,影响细胞形态。