目的 探索亚铁螯合酶(FECH)对胃癌细胞MGC8035-氨基酮戊酸(5-ALA)光动力治疗(PDT)中5-ALA 剂量的影响。
方法 在人胃癌细胞株MGC803中加入不同浓度(0、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mmol/L)5-ALA,避光培养4h,应用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞存活率。通过FECH 小干扰RNA(siRNA)干扰MGC803细胞中FECH 表达,优选出有较高的FECH 干扰效率的FECHsiRNA 用于干扰实验。PDT 实验设置空白组、FECHsiRNA 组、1.0mmol/L5-ALA 组和0.2mmol/L5-ALA+FECHsiRNA 组,使用发光二极管(LED)灯照射5min,照射波长为635nm,以相应的避光组作为对照。24h 后在光学显微镜下观察细胞形态,并采用CCK-8法检测活细胞率。
结果 加入2.0mmol/L5-ALA 的MGC803细胞存活率显著低于其余各组,差异均有统计学意义(p值均<0.05)。优选出的FECHsiRNA 干扰效率>80%。经5-ALA-PDT,空白组和FECHsiRNA 组活细胞率均>90%;1.0 mmol/L5ALA 和0.2 mmol/L5ALA+FECHsiRNA 组中活细胞率明显下降,分别为(17.13±1.63)% 和(2.50±1.04)%;与1.0 mmol/L5ALA 相比,0.2 mmol/L5ALA+FECHsiRNA组下降的更明显(p<0.05)。
结论 沉默FECH 能提高MGC803细胞5-ALA-PDT 效率并减少5-ALA 剂量,FECH 是MGC8035-ALA-PDT 治疗过程中的关键因素之一。