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编辑出版:
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邮编:
200040
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ISSN:
ISSN0253-9934
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多发性骨髓瘤患者自然杀伤细胞体外扩增及其抗自体骨髓瘤作用的研究
Autologous antitumor activity by ex-vivo expanded NK cells from myeloma patients
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DOI:
作者:
施菊妹,邵阳,吴晓松,艾工文,胡晓静,魏蓉,侯军,张燕香,郑军华
SHI Jumei,SHAO Yang,WU Xiaosong,AI Gongwen
作者单位:
同济大学医学院附属上海市第十人民医院 血液科
Department of Hematology; Shanghai Tenth People’s Hospital; Tongji University School of Medicine; Shanghai, China
关键词:
自体;自然杀伤细胞;扩增;多发性骨髓瘤
Autologous; Natural Killer cells; Expansion; Multiple myeloma
摘要:
目的 探讨体外高效扩增多发性骨髓瘤患者自身自然杀伤细胞(NK细胞)的方法,研究扩增前和扩增后NK细胞对骨髓瘤细胞株U266和自体骨髓瘤细胞的杀伤作用。方法 10例骨髓瘤患者的外周血单个核细胞与K562转基因细胞株在含不同浓度白介素2(IL-2)培养液中共育14天,采用流式细胞仪分析、3H-TdR掺入法和铬51释放法等方法,研究NK细胞的扩增情况、增殖能力、免疫表型和抗骨髓瘤作用。结果 300 IU/mL IL-2共培养体系扩增NK细胞平均约196倍,扩增后NK细胞存活率> 95%,IL-2能增强共培养体系中NK细胞的增殖能力。在效靶比为10:1时,扩增后NK细胞对自体骨髓瘤细胞的平均杀伤率为34.2±3.6%,显著高于扩增前NK细胞(平均杀伤率为3.9±1.7%,P<0.01)。结论 K562转基因细胞株能特异性刺激骨髓瘤患者NK细胞扩增,扩增后NK细胞抗自体骨髓瘤作用显著增强,扩增并活化的NK细胞将有望应用于临床作为治疗骨髓瘤的替代治疗方法。
Objective: To explore the possibility of ex-vivo expanding NK cells from multiple myeloma patients and investigate their cytotoxicity against U266 myeloma cell line and autologous tumor cells. Method: Mononuclear cells from the peripheral blood of 10 MM patients were co-cultrured with genetically modified K562 in the mediums containing various concentrations of IL-2 for 14 days. Amplification, proliferation, phenotype and anti-tumor effect of the NK cells were analyzed by using flow cytometry, 3H-TdR incorporation and 51Cr release assay. Result: The number of NK cells from 300 IU/mL IL-2 co-culture system had expanded on average 196-fold with a high viability of >95%. Also, IL-2 enhanced NK cells proliferation. Moreover, expanded NK cells showed significant increased cytotoxicity against primary autologous MM cells. At a 10:1 effector to target ratio, 34.2±3.6% of the targets were killed by the expanded NK cells, whereas unexpanded ones killed only 3.9±1.7% of targets. Conclusion: Genetically modified K562 cells can specifically stimulate the expansion of MM patients’ NK cells, which had significant augmented cytotoxicity against autologous MM cells. Based on these findings, we propose that autologous NK cells expanded ex vivo deserve further attention as a possible therapeutic strategy for multiple myeloma.
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