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smasmj@shsma.org.cn
ISSN:
ISSN0253-9934
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《丙泊酚通过促进蛋白SUMO化表达增加抑制神经母细胞系钙内流水平变化》正式投稿
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DOI:
作者:
常晶,陆菡,薛庆生,于布为
Chang Jing Lu Han Xue Qingsheng Yu Buwei
作者单位:
上海交通大学附属瑞金医院麻醉科
The Department of Anesthesiology, Ruijin Hospital, Shanghai Jiao-Tong University School of Medicine (SJTU-SM), Shanghai, P.R. China.
关键词:
丙泊酚,SUMO化修饰,神经母细胞瘤细胞系,钙内流,全麻机制
摘要:
目的:立足于SUMO化修饰这一蛋白质翻译后修饰的全新角度,通过研究丙泊酚对细胞蛋白SUMO化修饰及钙内流的变化探讨丙泊酚的全麻机制。 方法:采用western方法观察丙泊酚对神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)蛋白SUMO化水平变化的影响。并通过脂质体转染法将SENP1导入3×Flag-SUMO1-SHSY5Y,降低SUMO化水平以及采用SENP抑制剂处理细胞,过表达SUMO水平,以观察丙泊酚对细胞钙内流变化的影响。细胞内钙离子浓度测定选用Fluo-3AM钙离子荧光测定法。 结果:丙泊酚诱导3×Flag-SUMO1-SHSY5Y细胞系SUMO化水平呈时间依赖性及浓度依赖性增加,临床相关浓度的丙泊酚(50μmol/L)处理60min变化显著。丙泊酚引起细胞内钙内流呈双向性变化:在加入丙泊酚的最初数分钟,细胞内钙离子迅速增加,约10-15min达到峰值,后逐渐降低,以45-60min左右为转折点,随后逐渐低于对照组(p<0.05),与细胞内SUMO1水平变化趋势相同。在转入野生型SENP1(WT)细胞中,丙泊酚对其钙内流影响的双向性消失,作用60min及其以后的时间,并不出现对钙内流的抑制。而在表达突变体SENP1(mutate)及空载对照组细胞中,丙泊酚对钙内流的双向性影响仍然存在。给予SENP抑制剂后,可以增加丙泊酚引起的3×Flag-SUMO1-SHSY5Y细胞SUMO化水平升高,同时丙泊酚引起钙内流抑制相时间提前。 结论:丙泊酚通过诱导3×Flag-SUMO1-SHSY5Y细胞SUMO化水平表达增加抑制细胞钙内流变化,这也许是丙泊酚发挥抑制效应的全麻机制之一。
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