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ISSN:
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宫颈组织PAX1基因甲基化定量检测在宫颈癌诊断中的应用
PAX1 Methylation Quantitative Measurement for Cervical Cancer
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DOI:
作者:
徐灵,杨宝华,王立峰,屠红,徐军,朱昊平
Xu Ling,Yang Baohua, Wang Lifeng,Tu Hong,Xu Jun,Zhu Haoping
作者单位:
上海市闵行区中心医院 上海市闵行区中心医院 上海市闵行区中心医院 上海交通大学医学院附属仁济医院上海市肿瘤研究所 上海市闵行区中心医院 上海市计划生育科学研究所
Shanghai Minhang Central Hospital Shanghai Minhang Central Hospital Shanghai Minhang Central Hospital Shanghai Cancer Institue Shanghai Institute of Planned Parenthood Research
关键词:
配对盒家族基因1;DNA甲基化;宫颈癌;焦磷酸测序法
PAX1; DNA methylation; Cervvical cancer; Pyrosequencing
摘要:
目的 检测配对盒基因( paired box gene )家族PAX1基因在不同程度病变的宫颈组织中的甲基化水平,评估其作为宫颈上皮细胞癌变的分子标志物的诊断价值。 方法 使用焦磷酸测序法检测抑癌基因的不同位置甲基化情况。比较正常组织和不同程度病变组织的甲基化水平的的差异,其中正常组织28例、低级别病变(CIN I) 32例、高级别病变(CIN Ⅱ、Ⅲ) 34例、宫颈鳞癌27例。采用利用受试者工作特性曲线(ROC)确定不同程度病变组之间的判别临界值。按照阈值划分,进行不同程度宫颈病变组织中甲基化表达水平(甲基化程度(%)的平均值表示)差异定性分析。 结果 正常宫颈组为(4.92±4.45)%,低级别病变组(LSIL)为(5.55±5.05)%,高级别病变组(HSIL)(10.21±14.39)%,宫颈癌组(CSC)为(41.97±23.02)%。对四组资料进行单因素方差分析,发现四个病变组存在统计学差异(F=46.43,P<0.001)。各组间ROC曲线下面积均较高提示有一定的诊断价值,其中以正常宫颈、低级别病变合并组和高级别病变、宫颈癌合并组之间,以及非宫颈癌组和宫颈癌组之间的甲基化水平ROC曲线拟合较好,其ROC曲线下面积分别为0.680、0.883,敏感度与特异度之和的最大值所对应的界定值分别为8.97%(敏感度57%,特异度90%)和20.55%(敏感度81%,特异度93%)。 结论 焦磷酸测序法PAX1基因甲基化水平定量检测,较以往的定性分析有较大优势,对于宫颈癌早期临床诊断具有潜在诊断价值。
Objective To estimate a quantitative measure of the paired-boxed gene1 (PAX1) methylation in detection of cervical cancer. Methods We Comprise the degrees of methylation between normal and diseased tissue,there are 28 cases in the normal tissue group , 32 cases in the low-grade lesions (CIN I) group ,34 cases in the high-grade lesions group 27 cases in the cervical squamous cell carcinoma group.The percentage of PAX1 methylation was tested by pyrosequencing in different level of lesions. The efficacy of PAX1 in diagnosis of cercical cancer was tested by ROC curve. Results The percentage of methylated reference in normal cervical tissues was (4.92±4.45)%; The percentage of methylated reference in low-level lesions was (5.55±5.05)% ; The percentage of methylated reference in high-level lesions was (10.21±14.39)%; The percentage of methylated reference in cervical cancer was (41.97±23.02)%. All the groups were significantly different from each others(P<0.05)except the normal cervical tissues and low-level lesions(P>0.05).The area under the ROC curves were relatively high which prompt its diagnostic value. The ROC curve fitted better between CT-LSIL merger group and CSC-HSIL merger group, non-CSC group and CSC. The area under the ROC curve was 0.680 and 0.883, cut-point values were respectively 8.97%(sensitivity 57%,specificity 90%)and 20.55%(sensitivity 81%,specificity 93%). Conclusion Quatitative measurement of PAX1 by pyrosequencing in cervical caner scraping is highly sensitive and it may have a potential value for diagnosis of cervical cancer in clinic.
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