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ISSN:
ISSN0253-9934
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TSP-1通过活化TGF-β1促进人间皮细胞间皮间叶转化
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DOI:
作者:
张珍,姜娜,邵兴华,井冉,车霞静,庞慧华,牟姗*,倪兆慧*
ZHANG Zhen, JIANG Na, SHAO Xing-hua, JING Ran, CHE Xia-jing, PANG Hui-hua, MOU Shan *, NI Zhao-hui *
作者单位:
上海交通大学医学院附属仁济医院肾脏科
Department of Nephrology, Ren Ji Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200127,China
关键词:
血小板反应蛋白1;人间皮细胞;间皮间叶转化;转化生长因子β1
thrombospondin-1; human mesothelial cells; mesothelial-to-mesenchymal transition; transforming growth factor-β1
摘要:
目的 血小板反应蛋白1(thrombospondin-1,TSP-1)是转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的生理活化因子,本研究旨在探讨TSP-1对TGF-β1活性的调控在人间皮细胞间皮间叶转化(mesothelial-to-mesenchymal transition,MMT)中的作用及机制。方法 体外培养人间皮细胞株(Met-5A细胞),观察外源性TSP-1刺激下Met-5A细胞中TGF-β1的表达和活性,Smad通路活化、以及MMT标志因子(纤连蛋白[FN]、人III型胶原蛋白 [Coll III]、α平滑肌肌动蛋白[α-SMA]、snail)表达的变化。同时使用TGF-β1中和抗体再次检测TSP-1刺激下Met-5A细胞中Smad通路活化及MMT发生的变化。结果 TSP-1刺激上调了Met-5A细胞中TGF-β1的表达量和活性,激活了TGF-β1/Smad信号通路,上调了FN、Coll III、α-SMA、snail在蛋白质和基因水平的表达(p<0.05)。TGF-β1中和抗体可部分下调TSP-1引起的Smad通路活化并降低TSP-1引起的MMT标志因子mRNA表达的上调(p<0.05)。结论 TSP-1通过活化TGF-β1/Smad信号通路促进人间皮细胞MMT的发生。
Objective Thrombospondin 1 (TSP-1) is an endogenous activator for pro-fibrotic mediator transforming growth factor-β1 (TGF-β1).The present study investigated the effect of TSP-1 on mesothelial-to-mesenchymal transition (MMT) in human mesothelial cells. Methods Immortalized human mesothelial cells (Met-5A cell) were treated with exogenous TSP-1 in the presence or absence of a neutralizing antibody to TGF-β1. TGF-β1 secretion and bioactivity were measured by ELISA and MLEC bioassay, respectively. The expression of MMT molecules (FN, Coll III, α-SMA, Snail) and activation of Smad signaling were assessed by quantitative real-time PCR or western blot analysis. Results TSP-1 activated TGF-β1 and induced MMT in Met-5A cells, demonstrated as elevated TGF-β1 bioactivity, phosphorylation of Smad signaling, and increased expression of FN, Coll III, α-SMA and Snail. Inhibition of TGF-β1 abrogated the effect of TSP-1 on Smad signaling phosphorylation and induction of MMT in Met-5A cells. Conclusions TSP-1 triggers MMT in Met-5A cells through activation of TGF-β1/Smad signaling pathway.
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