目的 通过对先兆子痫(PE)高风险孕妇补充维生素D3,检测其外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)表达及其分泌促炎性细胞因子的情况,阐明维生素D3 在预防PE 发生过程中的作用。
方法 根据子宫动脉异常多普勒波形,选取60例PE 高风险孕妇,随机双盲分入维生素D3 组和安慰剂组两组,每组30例,自孕20~32周起,维生素D 组每日服用2000U 维生素D3,安慰剂组服用安慰剂,均持续服用12周。12周后采集两组孕妇肘前静脉外周血4mL,采用电化学发光免疫法检测外周血血清25羟维生素D[25(OH)D]质量浓度,采用流式细胞术(FCM)检测外周血单核细胞TLR4表达(以平均荧光强度和细胞阳性率表示),并分析安慰剂组单核细胞TLR4阳性率与外周血血清25(OH)D 质量浓度的相关性。再将两组孕妇各分为2个亚组(每组15例),分离外周血单核细胞分别经0或50ng/mL 脂多糖(LPS)刺激18h后,收集培养上清液,通过液相芯片分析系统检测TNF-α、IL-6和IL-10的质量浓度。计算两组孕妇的PE 发病率。
结果 维生素D3 补充12 周后,维生素D3 组25(OH)D的质量浓度为(34.91±4.36)μg/L,显著高于安慰剂组同时间的(16.09±4.51)μg/L(p<0.05);维生素D3 组的单核细胞TLR4阳性率和平均荧光强度分别为23.6%(17.4%,38.6%)和26.7(20.5,38.9),均显著低于安慰剂组的38.7%(21.4%,60.5%)和37.4(22.3,56.8),差异具有统计学意义(p值均<0.05)。安慰剂组单核细胞TLR4阳性率与PE 孕妇外周血血清25(OH)D 质量浓度呈负相关(r=-0.532,p=0.0025)。经LPS 刺激培养18h 后,维生素D30ng/mL 亚组和维生素D350ng/mL 亚组的上清液TNF-α、IL-6、IL-8质量浓度分别显著低于安慰剂同剂量亚组,IL-10 质量浓度显著高于安慰剂同剂量亚组(p值均<0.05)。维生素D3 组外周血TNF-α、IL-8和IL-6的质量浓度分别显著低于安慰剂组(p值均<0.05),IL-10 的质量浓度显著高于安慰剂组(p<0.05)。维生素D3 组的PE 发病率为20.0% (6/30),显著低于安慰剂组的43.3%(13/30,p<0.05)。
结论 PE 高风险孕妇经补充维生素D3,可降低外周血单核细胞TLR4 的表达,从而使得促炎性细胞因子IL-6和TNF-α分泌减少,PE 发病率显著降低。提示,通过补充维生素D3 抑制单核细胞TLR4表达可能是预防PE 的新途径。